螺旋藻对幼兔生长、免疫功能及血液生化指标的影响
螺旋藻对幼兔生长、免疫功能及血液生化指标的影响林春榕 左绍远 张翠香
（大理学院基础医学院，云南大理671000）
摘 要：试验旨在观察螺旋藻对生长期（断奶至3月龄）肉兔的生产性能、免疫功能、抗氧化作用及血液生化指标的影响。选用平均初始体重为(980+80)g的35日龄断奶新西兰兔80只，随机分为4个处理组：对照组、试验I、Ⅱ、Ⅲ组，每组4个重复，每个重复5只。其中对照组饲喂基础日粮，试验 I、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加0.75%、1.5%、3%螺旋藻的基础日粮3试验结束后，每组选取接近平均体重的4只兔（公、母各半），分别测定试验兔的生产性能、免疫功能、抗氧化作用及相关血液生化指标、结果表明，与对照组相比，各试验组平均日增重增加，料重比降低，胸腺指数及血清IgG与总蛋白含量、血清SOD与GSH-Px活性升高，血清MDA与胆固醇含量下降二而对脾脏指数、血清IgA、IgM、白蛋白、甘油三酯含量无明显影响、试验结果表明，日粮中添加0.75%、1.5%、3%的螺旋藻，可促进肉兔生长、降低料重比，提高肉兔机体免疫力及抗氧化能力，降低肉兔血清胆固醇含量。其中以1.5%、3%的添加水平效果较好。
钝顶螺旋藻（Spirulina platensis，SP）是蓝藻门、蓝藻纲、断增藻目、颤藻科中的螺旋藻属低等水生植物。SP是种微藻，体长约200~500μm，宽仅为5～10μm，因藻体呈螺旋状而得名。螺旋藻的蛋白质含量十分丰富，高达干重的60%~70%，禽有人类和动物所必需的全部营养必需氨基酸。螺
旋藻藻体细胞壁主要由粗蛋白组成，缺少纤维素，无需任何加工即可被动物消化吸收，消化率高达70%以上，生物学价值为79.5%~87.7%。研究表明，除丰富的蛋白质、多种微量元素、维生素外，SP尚含有螺旋藻多糖、蓝藻蛋白、β一胡萝卜素、γ一亚麻酸、肌醇等有益健康的生物活性物质，这些活性
物质具有提高机体免疫力、抗氧化、抗病毒等多种功效。随着我国畜牧业的不断发展，饲料资源日益紧张，而螺旋藻富含各种营养成分且其营养成分非常接近动物机体的需要标准，因此，SP有可能成为一种优质、高效、绿色的营养性饲料添加剂来源。本试验以SP为营养性饲料添加剂，观察了SP对断奶至3月龄新西兰兔生产性能、免疫功能、抗氧化作用及部分血液生化指标的影响，以期为SP在肉兔生产中的实际应用提供依据。
1材料与方法
1.1试验动物与试验设计
选择断奶日龄35 d，体重为(980+80)g、健康状况良好的新西兰兔80只，公母各半，采用单因子完全随机分组设计，随机分为4个处理组：对照组、
试验I组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，每组4个重复，每个重复5只兔。组间体重无显著差异(P>0.05)。进兔前将兔舍、兔笼消毒，4层笼养。其中对照组饲喂基础日粮,试验I、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加0. 75%、1.5%、3%螺旋藻的基础日粮。螺旋藻粉由云南永胜程海蓝宝股份有限责任公司提供(批号:20110912)。试验期间日喂食3次，时间分别为08: 00、12: 00、18: 30，并根据喂料后兔的采食情况增减喂料量（以下次投料前料槽略有余料为宜），使其处于自由采食状态，自由饮水，兔舍自然通风，自然采光，每3—5 d消毒兔舍1次。预试期7 d，正试期30 d。
1.2基础日粮
基础日粮（对照组）参照NRC(1977)家兔饲养标准配制而成，基础日粮组成及营养水平见表1。用制粒机将日粮压制成直径约4～6 mm的颗粒饲
料，储存在通风干燥避光处备用。
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1.3测定指标和方法
1.3.1生长性能指标测定
于正式试验期开始当天晨饲前空腹12 h称重作为试验兔始重，试验结束后空腹称重作为试验兔末重，两者相减即为增重，计算}H平均日增重。正式试验期内每天准确记录采食量，用于计算平均日采食量。日均采食量与平均日增重之比即为料重比。
1.3.2检测样品采集与制备
在试验开始后的第30 d早晨空腹称重后，每组随机抽取4只体重接近平均体重的兔子，心脏采血8 ml，取0.5 ml测血糖，其余缓慢注入洁净离心管中，室温避光静置30 min，后，3 000r/min离心10 min，分离血清，置于-20℃下冰箱保存，用于免疫指标与生化指标检测、随即将将兔颈椎错位法致
死，屠宰后取脾脏和胸腺，并剔除脂肪组织，迅速称取已剔去脂肪的脾脏和胸腺的鲜重，并计算脾脏和胸腺指数。
免疫器官指数(g/kg)=免疫器官重(g)／宰前活重(kg)。
免疫球蛋白IgG、IgA 、lgM测定试剂盒为北京利德曼生化技术有限公司产品，按试剂盒说明书进行测定，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总蛋白、白蛋白、总胆同醇、甘油三酯测定试剂盒为南京建成生物工程研究所产品，按试剂盒说明书进行测定。
1.4数据处理
试验结果以“平均值±标准差(X±S)”表示。用SPSS 16.0统计软件进行方差分析，Duncan-s法多重比较，以P<0.05作为差异显著性判断标准。
2结果与分析
2.1螺旋藻对肉兔生产性能的影响（见表2）
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由表2可知，从平均日采食量来看，对照组和各试验组日均采食量差异不显著(P>0.05)，而试验Ⅱ、Ⅲ组兔平均日增重则显著高于对照组(P<0.05)。
试验I组平均日增重比对照组提高了12.90%，但差异不显著(P>0.05)；试验Ⅱ、Ⅲ组料重比显著低于对照组(P<0.05)，其中Ⅲ组料重比最低，与对照组相比降低了20.88%。
2.2螺旋藻对肉兔免疫器官指数的影响（见表3）
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由表3可以看出，添加螺旋藻后，各组肉兔脾脏指数均提高，但无明显差异( P>0.05)，而添加螺旋藻对胸腺指数影响明显，与对照组相比，各试验组肉兔胸腺指数均显著升高(P<0.05)，以3%螺旋藻添加水平组的胸腺指数达到最大值，比对照组提高了30.37%，但各试验组间相比差异不显著，表明添加不同水平的螺旋藻对肉兔胸腺指数的影响无剂量效应关系。
2.3螺旋藻对肉兔血清免疫球蛋白含量的影响（见表4）
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由表4可知，与对照组相比，螺旋藻处理I组对肉兔血清IgG无显著影响(P<0.05)，但螺旋藻处理Ⅱ、Ⅲ组对血清IgG有显著影响(P<0.05)，且随着螺旋藻添加量的增加，IgG呈现逐渐增加的趋势，其中以3%添加组效果最明显。但各处理组间无明显差异(P>0.05)。而螺旋藻对血清IgA与IgM则无明显的影响(P>0.05)。
2.4螺旋藻对肉兔血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH- Px)活性及丙二醛(MDA)含量的影响（见表5）
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表5结果表明，与对照组相比，添加螺旋藻后，各处理血清SOD活性明显升高(P<0.05)，分别比对照组提高了23.94% .29.78% ,44. 13%；1.5%、3%添加水平可使GSH-Px活性显著升高(P<0.05)，但0. 75%的螺旋藻添加水平对GSH-Px活性无明显影响(P>0.05)；0.75%、1.5%、.3%的螺旋藻添加水平还使血清MDA含量显著降低(P<0.05)，但各试验组间无明显差异(P>0.05)。
2.5螺旋藻对肉兔血清生化指标的影响（见表6）
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从表6结果可看出，日粮中添加0.75%、1.5%、3%的螺旋藻，血清总蛋白含量呈逐渐升高的趋势。与对照组相比，1. 5%、3%的螺旋藻添加水平可使血清总蛋白含量明显升高(P<0.05),分别升高16.0%、19.31%。但0.75%螺旋藻添加水平对总蛋白含量无明显影响。另外，日粮中添加0.75%、1.5%、3%的螺旋藻，可明显降低血清胆固醇含量(P<0.05)，与对照组相比，分别降低18.22%、21.50%、30.84%。而日粮中添加螺旋藻对血清白蛋白、甘油三酯含量无明显影响。
3讨论
3.1螺旋藻对肉兔生产性能的影响
目前，有关螺旋藻作为饲料添加剂在鱼、虾类养殖中的应用已有研究报道，但在肉兔的养殖中少一见报道。螺旋藻是一种富含优质蛋白质的微藻，其细胞壁非常薄，极易被动物消化为氨基酸而吸收。而当必需氨基酸数量与种类满足动物需要日寸，动物的生长性能才能达到最佳水平。动物机体对蛋白质的需要从本质上来说是对氨基酸的需要。螺旋藻中含有18种以上氨基酸，且含量丰富、组成均衡，可有效地补充动物对氨基酸的需求。本试验研究结果表明，日粮中添加0. 75%、1.5%、3%的螺旋藻，对照组和各试验组日均采食量并无明显差异，而添加1.5%、3%的螺旋藻组肉兔平均日增重显著高于对照组，料重比则显著低于对照组，但添加0.75%的螺旋藻对肉兔平均日增重及料重比则无明显影响(P>0.05)。
3.2螺旋藻对肉兔免疫器官指数及血清免疫球蛋白含量的影响
脾脏和胸腺是动物最为重要的免疫器官，胸腺在淋巴细胞的形成、分导、分化过程中起着重要的作用；脾脏是动物的外周免疫器官，是T、B淋巴细胞定居和对抗原刺激进行免疫应答的场所。免疫器官指数是免疫器官重与活体重的比值，它是衡量动物机体免疫水平的重要指标之一。免疫器官指数越大，表明动物的免疫功能越强。而血清IgG、IgA、IgM 3种免疫球蛋白是参与体液免疫的主要抗体，三者在血清中的含量可以代表机体的体液免疫水平。本试验结果表明，日粮中添加0.75%、1.5%、3%的螺旋藻，可显著提高肉兔胸腺指数(P<0.05)，添加1.5%、3%的螺旋藻可促进血清IgG水平升高(P<0.05)，表明螺旋藻具有促进动物机体免疫功能的作用，提高动物抵抗疾病的能力，其机制可能与螺旋藻的活性成分螺旋藻多糖有关。
3.3螺旋藻对血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(CSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量的影响
自由基是机体正常或异常生化反应的产物，它的生成会对包括免疫细胞在内的所有细胞造成严重毒害，不仅损害细胞膜的结构，而且影响蛋白质功能、DNA结构和细胞内能量代谢。而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是体内最重要的抗氧化酶类之一，在机体抗氧化、抗自由基损伤中起着重要作用，能有效地清除体内产生的自由基，从而维持体内自由基产生和清除的动态平衡，对机体具有较好的保护作用。MDA是体内自由基反应的终末产物，其含量可间接反映体内自由基的多少及反应的强度。本试验结果表明，日粮中添加螺旋藻，可使SOD活性显著提高，同时1.5%、3%的添加水平还可使GSH-Px活性显著提高(P<0.05)。另外，0.75%、1.5%、3%的螺旋藻添加水平还使血清MDA浓度明显降低，与对照组相比，差异显著(P<0.05)。表明螺旋藻具有较好的清除白南基能力，保护机体免受过氧化损伤。
3.4 螺旋藻对兔肉血清生化指标的影响
血清总蛋白和白蛋白水平是判断动物营养状况的重要指标之一，同时也可反映日粮蛋白质的营养水平、动物对蛋白质的消化吸收程度。本试验结果表明，日粮中添加1.5%、3%的螺旋藻，可使肉兔血清总蛋白的含量显著升高(P<0.05)。表明添加螺旋藻后，氨基酸的种类和数量基本平衡，肉兔对蛋白质的消化以及对氨基酸的吸收、利用得到进一步改善。
胆固醇与甘油三酯是血脂的主要成分。尤其是胆固醇，是动脉粥样硬化形成的主要原因，血液中长期过高的胆固醇及血管壁上过多的脂类容易被自南基氧化，形成脂质过氧化物，在血管壁上沉积，从而导致动脉粥样硬化。动脉粥样硬化可导致动物心、脑血管疾病。已有研究表明，螺旋藻可降低高脂血症大鼠血脂。本试验结果表明，日粮中添加0.75%、1.5%、3%的螺旋藻，可明显降低血清胆固醇含量(P<0.05)，与对照组相比，分别降低18.22%、21.50%、30.84%。但螺旋藻对甘油三酯含量无明显影响。因此，日粮中添加螺旋藻可预防肉兔动脉粥样硬化的形咸。
综上所述，日粮中添加螺旋藻，可促进肉兔生长、降低料重比，提高肉兔机体免疫力及抗氧化能力，降低肉兔血清胆固醇含量。其中以1 .5%、3%的添加水平效果较好。
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